"Vi står enade upp för rättssäkerheten och mot beslutet att åtala finansministern på anklagelser som, enligt en övervägande del av den juridiska expertisen, saknar både faktamässig och rättslig grund", heter det i företagsledarnas tidningsannons som publicerades på söndagen.
De utmålar åtalet mot Gordhan som en del i ett politiskt spel som skadar den redan bräckliga sydafrikanska ekonomin, vid en tidpunkt då landet hotas av att få sitt kreditbetyg nedskrivet.
Bland namnen som skrivit under finns vd:ar från de största sydafrikanska företagen inom bland andra gruvnäringen, mediebranschen och banksektorn – däribland Anglo American, Barclays Africa Group och Naspers.
Åtalet mot Gordhan gäller att han, under tiden som chef för landets skattemyndighet, ska ha gjort sig skyldig till bedrägeri genom att ha godkänt en förtidspensionering av en kollega som han sedan återanställt som konsult. Detta ska ha kostat myndigheten omkring 1,1 miljoner rand (motsvarande 700000 kronor).
Finansministern nekar till anklagelserna, som han kallar politiskt motiverade.
Gordhan har sedan han tillträdde i slutet av förra året kommit på kant med lojalister till president Jacob Zuma.
Chefen för Sydafrikas åklagarmyndighet, Shaun Abrahams, förnekar politiska motiv till åtalet.